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液相色谱仪分析前分离目的的确定办法

液相色谱仪分离的目的需要十分明确,下面的问题在建立方法之初就应确定:

(1)主要目的是什么?定量或定性,还是定性、定量同时做?;
(2)是否有必要解析出样品的所有成分?譬如可能有必要分离出产品中的所有降解物或杂质,以使含量测定结果更加可靠,但却没必要将它们彼此完全分开。
(3)如要求定量分析,准确度与精密度需多大?样品主要成分的精密度通常能达到±1—2%,特别是不需样品预处理的情况。
(4)特殊化合物可能会以不同的样品形式出现(如:原料药,一种或多种形态,环保样品等)。是否需要一种以上的HPLC方法?单一方法分离不同形态样品是否理想?
(5)一次将分析多少样品?当需要同时处理大量样品时,运行时间将变得非常重要。
有时甚至为了缩短运行时间而以牺牲样品分离度作代价,如缩短柱长或加快流速。当一次分析的样品数目超过10个,运行时间一般应控制在20min以内。
(6)将要使用该方法的实验室中,有哪些HPLC设备?色谱柱能否恒温系统能否做梯度洗脱?该方法是否可在不同设计与生产的设备上运行?
方法建立实验开始之前,应明确对方法的这些要求。

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