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食品中香兰素的高效液相色谱仪(HPLC)检测方案

香兰素Vanillin),又名香草醛,为一种广泛使用的可食用香料,可在香荚兰的种子中找到,也可以人工合成,有浓烈奶香气息。广泛运用在各种需要增加奶香气息的调香食品中,如蛋糕、冷饮、巧克力、糖果;还可用于香皂、牙膏、香水、橡胶、塑料、医药品。

目前还没有相关报道说香兰素对人体有害。?但是不可过量,据欧盟专家委员会2000224日报导,大剂量可导致头痛、恶心、呕吐、呼吸困难,甚至损伤肝、肾等,故正商订降低允许剂量中。

以下是食品中香兰素的液相色谱仪测定的详细检测方法。

1??仪器与试剂

1.1?仪器
??LC-10Tvp高效液相色谱仪;
??Vertex?色谱柱?250mm×4.6mm×5μm
??超声波水浴;
??万分之一天平;
??组织捣碎机;
??微孔滤膜:0.45μm,水相。

1.2?试剂
??甲醇:色谱纯。
??无水乙醇。
??磷酸溶液:0.01mol/L
??香兰素标准工作液:称取一定量的香兰素用流动相溶解配置成100mg/l的溶液,逐级稀释到一定的浓度作为工作液。

2??测定原理
??样品加适量乙醇经超声波提取,经高效液相色谱仪测定,外标法定量。

3??色谱条件
??色谱柱:Vertex?色谱柱?250mm×4.6mm×5μm??????????
??流动相:甲醇+磷酸水溶液0.01mol/L(25+75)
??流速:1 mL/min
??进样量:20μL
??检测波长:350nm

4??试样溶液的制备
??样品制备:固体样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用;液体样品摇匀后备用。
??试样处理:准确称取一定量的(精确至0.01g)试样至500mL离心管中,加入20mL乙醇,混匀,经超声波浸提30min后,4000r/min离心5min,取上清液1ml,加入4ml的流动相,混匀,经0.45μm微孔滤膜过滤后,待液相色谱测定。

5??结果分析
??在添加0.25g/kg-5.0g/kg范围内,回收率在89%-106之间,相对标准偏差小于5%

色谱图如下图所示,其峰型较好,满足日常检测要求。

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