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头孢氨苄有关物质的检测方案

头孢氨苄Cefalexin) 抗生素β-内酰胺类头孢菌素类。它能抑制细胞壁的合成,使细胞内容物膨胀至破裂溶解,杀死细菌。因其生产过程中引入的杂质主要有以下两种:?

-7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸-

7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7ADCA)是合成头孢氨苄、头孢拉定、头孢羟氨苄等头孢品种的主要中间体。化学名:3-甲基-7-氨基-8氧代-5硫杂-1-氧杂双环【4、2、0】辛-2-烯=2=甲酸,本品为白色或类白色结晶性粉末,几乎不溶于水,醇和丙酮。

-α-苯甘氨酸-

α-苯甘氨酸及其衍生物是一种重要的医药中间体,常用于合成氨苄青霉素、头孢氨苄、头孢拉定等β-内酰胺类抗生素,也用于合成多肽激素和多种农药。本品为白色或类白色结晶性粉末,不溶于一般的有机溶剂。

1、仪器与试剂

? ? 1.1仪器、设备

? ??LC-600液相色谱仪(南京科捷)

? ? 色谱柱:250mm×4.6mm×5μm

? ? 分析天平

? ? 针头过滤器

? ? 微孔滤膜:0.45?m

? ? 1.2试剂

? ? 甲醇(HPLC)

? ? 磷酸二氢钠(AR)

? ? 氢氧化钠 (AR)? ??

2、供试品溶液和对照品溶液的制备

? 对照品品溶液的制备 ?取7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸,α-苯甘氨酸对照品各约10mg,置同一100ml容量瓶中,加PH为7.0的磷酸盐缓冲液约20ml,超声使溶解,再用流动相A稀释定容至刻度,摇匀,精密量取5.0ml,置50ml容量瓶中,用流动相A定容至刻度,摇匀,作为杂志对照品溶液。

? 供试品溶液的制备 ?精密称取本品0.0500g,置50ml容量瓶中,加流动相A溶解并稀释定容至50ml,制成每1ml中含1.0mg的溶液,作为供试品溶液样品对照的制备,精密量取1ml供试液置100ml容量瓶中,用流动相A稀释定容至100ml,摇匀,作为对照溶液。

?

3、色谱条件

? ? 色谱柱:C18, 4. 6 mmx250 mm,粒度5 ?m

? ? 流动相:以0.2mol/l磷酸二氢钠溶液为流动相A,以甲醇为流动相B,梯度脱洗;

? ? 波长:220nm

? ? 流速:1. 0 mL/min

4、测定法

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液及样品对照溶液各20ul,注入液相色谱仪,测定,即得

5、谱图

?

仪器配置:

型号名称

配置

数量

?

?

液相色谱仪LC-600A

(智能全控)

?

UV600紫外检测器

??1台

P600恒流泵(0.001~9.999ml/min?

2台

美国原装进口7725i进样阀(含支架)

1只

100ul进样针

1只

梯度混合器

1只

工具包(含管路托盘)

1只

液相色谱柱

250×4 .6,5um ??C18进口

1

分析天平

200g.1mg

1

JL-120DTH超声波清洗器

加热 ???3L

1

KJ330色谱柱温箱

恒温误差±0.1

1

溶剂过滤器

含真空泵

1

滤膜

有机、水系过滤膜 ?2

有机、水系过滤器 ?2盒 ???

1

流动相储液瓶

?

2

电脑、打印机

?

1

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