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胭脂虫红的高效液相色谱检测方案

胭脂虫红】

胭脂虫红是从生长在不同地区、不同类型的仙人掌上的胭脂虫体内提取的一种天然色素,并且是从雌胭脂虫体内提取的一种蒽醌衍生物,外观呈红色菱形晶体或红棕色粉末,可用作食品、药品及化妆品着色,特别是漱口剂、牙粉、撒粉、油膏,是5139 vip威尼斯人国认可的食品添加剂。市场上销售的胭脂虫红产品也有一些是呈深红色粘稠液体。不溶于冷水,稍溶于热水或乙醇,能溶于碱不溶于稀酸、乙醚、氯仿、苯,在碱与稀酸中,色泽随溶液的pH而变化,酸性时呈橙黄色,中性时呈深红色,碱性时呈紫红色。胭脂虫红的分子结构式如图所示 :

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图为胭脂虫红色素

【胭脂虫红事件】

国家质检总局近日公布最新一批不合格进口食品、化妆品黑榜单,248批进口食品、8批化妆品被拒国门外,其中包括来自新西兰、阿根廷等国的乳制品,多国的婴幼儿米粉产品也“榜上有名”,在此次公布的黑名单中,共有19批来自新西兰的嘉仕堡巴氏杀菌高钙脱脂乳、调制乳,存在违规使用胭脂虫红、菌落总数超标等问题;针对此次嘉仕堡巴氏杀菌调制乳违规使用胭脂虫红的问题,食品专家推测,问题很可能出在添加剂量上。根据5139 vip威尼斯人国食品添加剂使用标准中的规定,胭脂虫红色素有适用范围,添加量也根据食品的种类不同有所不同。违规要么超范围、要么超剂量使用,调制乳中是可以使用的,因此有可能是超剂量使用。除此之外,“榜上有名”的还有由比利时Belfine BVBA公司生产的16款巧克力,其在上海口岸进行入关检测时被检疫部门检测发现,该品牌巧克力的贝尔芬圣诞节巧克力条、瓢虫巧克力棒、雪人巧克力棒等都存在违规使用“胭脂虫红”色素的问题,按照5139 vip威尼斯人国法规只能销毁,对此中国农业大学食品学院副教授朱毅推测,其违规原因很可能出在添加剂量上。因此建立一种稳定、准确、高效的胭脂虫红检测方法十分必要。

1、仪器与试剂

??1.1 仪器

? ??LC-10Tvp高效液相色谱仪。

? ? Vertex 色谱柱?250mm×4.6mm×5μm。

? ? 超声仪。

? ? pH计。

? ? 万分之一天平。

? ? 针头过滤器。

??固相萃取仪。

??HLB固相萃取小柱。

??移液枪。

??氮吹仪。

? ? 微孔滤膜:0.45?m 。

? ? 涡旋混匀器。

??1.2 试剂

??甲醇:HPLC

??乙酸铵:AR

??三氯乙酸:AR

??柠檬酸:AR

??PH为4的水:用柠檬酸溶液调节水的PH值为4

2、供试品溶液和对照品溶液的制备

对照品溶液的制备:准确称取胭脂虫红标准品0.0050g,置10ml容量瓶中,用PH为4的水定容至10ml,摇匀,得标准储备液(0.5mg/ml)。

供试品溶液的制备:

样品制备:称取一定量的市售果汁于烧杯中,50℃水浴加热40min除去其中的二氧化碳,放置,冷却至室温。

试样处理:称取约5.000g上述样液于50mL容量瓶中进行加标,将样品用质量分数为1%的三氯乙酸定容至50ml,过滤。滤液备用。

净化:用3ml甲醇和3ml水活化过的HLB固相萃取小柱,取滤液10ml,依次加入到固相小柱中,带滤液流尽,用5ml水淋洗小柱,抽干,用3ml甲醇洗脱,收集洗脱液于50℃氮气吹干,用1ml水溶解残渣,用0.45μm微孔滤膜过滤,上机分析。

3、色谱条件

?色谱柱:Vertex 色谱柱?250mm×4.6mm×5μm;

?流动相:0.02mol/l乙酸铵(PH=4):甲醇=65:35;

?流速:1 mL/min;

?进样量:20μL;

?检测波长:254nm

4、测定法

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul,注入液相色谱仪,测定,即得

5、谱图

?

5.1 胭脂虫红标准曲线:

?

相关系数:R2=0.99791

?5.2样品

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5.3 加标样品

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5.4 标准品

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