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中药【红花】的高效液相色谱法检测方案

【红花】

红花又称草红花,双子叶植物,菊科,干燥不带子房的管状花,长约1~2厘米,红黄色或红色,花管狭细,先端5裂,裂片狭线形,长5~8毫米,雄蕊5枚,花药黄色,联合成管,高出裂片之外,其中央有柱头露出。具特异香气,味微苦。以花片长、色鲜红、质柔软者为佳。主产河南、浙江、四川等地。活血通经,去瘀止痛。用于经闭,痛经,恶露不行,症瘕痞块,胸痹心痛,瘀滞腹痛,胸胁刺痛。跌扑损伤,疮疡肿痛。

【含量测定】

1、羟基红花黄色素A:

对照品溶液制备:精密称取羟基红花黄色素A对照品适量,加25%甲醇制成每1mL含0.13mg的溶液,即得。

供试品溶液制备:取本品粉末(过三号筛)约0.4g,精密称定。置具塞锥形瓶中,精密加入25%甲醇50mL,称定重量,超声提取(功率300W,频率50kHz)40min,放冷,再称定重量,用25%甲醇补足减失的重量,摇匀,用0.45um滤膜过滤,即得。

【色谱条件】

检测器:紫外检测器,检测波长:403nm

色谱柱:亲水性C18柱或相当的色谱柱(4.6mm*250mm,5.0um)

流动相:甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液=26-2-72

流速:1.0mL/min

柱温:室温

进样量:10uL

【色谱图】

?

2、山萘素:

对照品溶液制备:

取山萘素对照品适量,精密称定,加甲醇溶解稀释并定容至刻度,制成每1mL含9ug的溶液,即得。

?

供试品溶液制备:

取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入25%甲醇25mL,称定重量,加热回流30min,或65℃水浴中超声提取45min,放冷,在称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,精密量取续滤液15mL,置平底烧瓶中,加盐酸溶液(15-37)5mL,摇匀,置水浴中加热水解30min,立即冷却,转移至25mL量筒中用甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45um滤膜过滤,即得。

【色谱条件】

检测器:紫外检测器:检测波长:367nm

流动相:甲醇-0.4%磷酸水溶液=48-52

色谱柱:C18柱(4.6mm*250mm,5.0um)

流速:1.0mL/min

柱温:室温

进样量:10uL

【色谱图】

?

仪器配置:

型号名称

配置

数量

?

?

液相色谱仪LC-600A

(智能全控)

?

UV600紫外检测器

??1台

P600恒流泵(0.001~9.999ml/min?

1台

美国原装进口7725i进样阀(含支架)

1只

100ul进样针

1只

工具包(含管路托盘)

1只

液相色谱柱

250×4 .6,5um ??C18进口

1

分析天平

200g.1mg

1

水浴锅

?

1

JL-120DTH超声波清洗器

加热 ???3L

1

溶剂过滤器

含真空泵

1

滤膜

有机、水系过滤膜 ?2

有机、水系过滤器 ?2盒 ???

1

流动相储液瓶

?

2

电脑、打印机

?

1

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