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高效液相色谱系统在日常中主要用以下这四种色谱法


高效液相色谱系统根据分离机制的不同,HPLC原理可分为离子交换色谱法、分子排阻色谱法、液固吸附色谱法及液液分配色谱法。

 

1、离子交换高效液相色谱法:

  固定相是离子交换树脂。树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。

 

2、分子排阻色谱法:

  分子排阻色谱法又称凝胶色谱法,它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。分子排阻色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料,有一定的形状和稳定性,利用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完成分离。根据所用流动相的不同,凝胶色谱法可以分为两类:即用水溶剂做流动相的凝胶过滤色谱法(GFC)与用有机溶剂如THF做流动相的凝胶渗透色谱法(GPC)。

 

3、液液分配色谱法:

  固定相为液体,根据被分离的组分在流动相和固定相中的溶解度不同而分离。依固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法和反相色谱法。正相色谱法采用极性固定相,流动相为相对非极性的疏水性溶剂,常用于分离中等极性和极性较强的化合物;高效液相色谱系统法一般用非极性固定相,流动相为水或缓冲溶液,适用于分离非极性和极性较弱的化合物。



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